ความชุกของกระแสเลือดในสัตว์จากสัตว์สู่คนค่อนข้างสูงใน Orientogalba ollula และลักษณะพัฒนาการของตัวสั่นแบบแยกเดี่ยวโดยการติดเชื้อทดลองในแบบจำลองสัตว์ | โรคติดเชื้อแห่งความยากจน

ข้อมูลทั่วไปเกี่ยวกับข้อมูลตัวอย่างและการสำรวจ

ตัวอย่างหอยทาก สวัสดี รวบรวมจาก 54 ไซต์ (แสดงในรูปที่ 1 และไฟล์เพิ่มเติม 1: รูปที่ S1) โดยมีลานเกลียว 38–214 ตัวจากแต่ละไซต์ Trematodes ถูกพบใน 17 ไซต์ที่ทำการสำรวจหลังจากการผ่า รวมถึงอ่างเก็บน้ำ Tianbao และหมู่บ้าน Hede ในเมืองหนานหนิง เมืองหลิวซาน หมู่บ้านหลิวถัง หมู่บ้านกวงหรง และหมู่บ้านชา ในเมืองหลิ่วโจว และเมืองมาหลิงในเมืองกุ้ยหลิน ในระหว่างการผ่า พบว่าระยะต่าง ๆ ของการพัฒนา trematode (เรเดีย cercaria และ metacercaria)

รูปที่ 1:
รูปที่ 1

ข้อมูลโดยละเอียดเกี่ยวกับสถานที่เก็บตัวอย่าง การเลือกตัวอย่าง และวิธีการรวบรวมข้อมูล เอ, ข: สภาพแวดล้อมทางนิเวศวิทยาโดยทั่วไป สวัสดี (ประเภทที่ 1 พื้นที่: พื้นที่ปลูกข้าว); ค: สวัสดี ภาพด้านหน้า; ง:, อี: สภาพแวดล้อมทางนิเวศวิทยาโดยทั่วไป สวัสดี (ประเภทที่ 2 พื้นที่ : พื้นที่ปกคลุมไปด้วยพืชผลทางการเกษตรที่มักใช้เป็นอาหารดิบ) ฉ: สวัสดี มุมมองด้านหลังของภาพ

การระบุสายพันธุ์ สวัสดี

ลักษณะทางสัณฐานวิทยา สวัสดี จำแนกตามลักษณะเฉพาะของเปลือกเชิงปริมาณแบบดั้งเดิม (เปลือกขนาดกลางถึงใหญ่ บาง สีน้ำตาลหรือสีเหลือง ความสูงของเปลือก 10 มม. ความกว้างของเปลือก 8 มม. แถบเกลียวสีน้ำตาลที่แยกจากกัน 4-5 แถบ รูปวงรีรูปวงรี รูสำหรับสายสะดือเหมือนร่อง) สวัสดี วัตถุที่เก็บรวบรวมในการศึกษานี้มีขนาดเล็ก รูปไข่ และมีเยื่อบางๆ และรูรับแสงขนาดเล็ก (รูปที่ 1C, F) ข้อมูล ITS1 ของหอยทากที่จัดลำดับทั้งหมดสอดคล้อง 100% กับข้อมูลลำดับที่รายงานก่อนหน้านี้ใน GenBank ภายใต้เลขทะเบียน HM769888–HM769898

คำอธิบายลักษณะทางสัณฐานวิทยาและการระบุโมเลกุลของตัวอ่อนตัวสั่น

โดยทั่วไป ลักษณะทางสัณฐานวิทยาของเอไคโนสโตมทั้งสาม (Echinostoma sp., H. conoideumและ: ง. โดยจักรยาน) แสดงความคล้ายคลึงกันอย่างมีนัยสำคัญทางสัณฐานวิทยา (รูปที่ 2) เรดเดียเป็นทรงกระบอก ทื่อที่ปลายทั้งสอง ชี้ไปที่หัวเล็กน้อยและชี้ไปที่หางมากกว่า ร่างกายโน้มตัวไปทางพื้นผิวหน้าท้องด้วยขาที่แข็งแรง และการเคลื่อนไหวก็ช้า หางของ cercariae ไม่ได้แยก (รูปที่ 2B–H) นอกเหนือจากความคล้ายคลึงกันทั่วไป เจ้านาย H. conoideum cercariae แสดงให้เห็นหนามที่เด่นชัด เช่นเดียวกับ ventral suckers, pharyns และ guts (รูปที่ 2D–F) metacercariae นั้นกลมและมีผนังโปร่งใสสองด้าน ผนังด้านนอกหนากว่าผนังด้านใน พบตัวดูดช่องท้องและเม็ดหักเหของตัวอ่อนภายในถุงน้ำ เนื่องจากการเคลื่อนไหวของตัวอ่อนภายในถุง ทำให้มองเห็นกระดูกสันหลังเล็กๆ รอบหัวได้ไม่ง่ายนัก วิทยุของ ออสตราโลปาเตมอน sp. มีลักษณะนูนชัดเจนในหัว ตัวอ่อนของ Cercariae มีหางที่ยาวกว่าความยาวของลำตัว cercaria ของ: พี อกหัก มีหางเป็นง่าม ปากดูด และคอหอยที่มองเห็นได้ (รูปที่ 2J–L)

รูปที่ 2:
รูปที่ 2

สัณฐานวิทยาของ rediae ที่เก็บรวบรวม cercariae และ metacercariae สวัสดี. เอค: Rediae, cercariae และ metacercariae ของ: Echinostoma sp.; ง:ฉ: Rediae, cercariae และ metacercariae ของ: Hypoderaum conoideum; ค:ใน: Rediae, cercariae และ metacercariae ของ: Echinostoma revolutum; เจ:, เค: Rediae และ cercariae ของ: ออสตราโลปาเตมอน sp.; แอล: Cercariae ของ: หัวใจคอหอย

สปีชีส์ trematode ที่แยกได้ถูกกำหนดโดยการขยายขอบเขตของ ITS2 และตรวจสอบโดย BLAST การวิเคราะห์ PLAST ของลำดับตัวอ่อนของตัวสั่นไหวที่จัดลำดับแสดงให้เห็นระดับสูงสุดของความเหมือนกันของลำดับ (ความเหมือนกันของลำดับ 99% ถึง 100%) ต่อลำดับที่รายงานใน GenBank เราพบ trematodes ห้าประเภท ได้แก่ : ออสตราโลปาเตมอน sp., Echinostoma sp., ง. โดยจักรยาน, H. conoideumและ: พี อกหัก. ความยาวของ ITS2 คือ 292 bp, 429 bp, 430 bp, 432 bp และ 294 bp ตามลำดับ ลำดับนิวคลีโอไทด์ที่ได้จากการศึกษานี้ถูกฝากไว้ในฐานข้อมูล GenBank ภายใต้หมายเลขภาคยานุวัติ KM980466–KM980471 (ออสตราโลปาเตมอน sp.), KJ848453–KJ848455 (Echinostoma sp.), KM980474 และ KM980476–KM980477 (ง. โดยจักรยาน), KJ944311–KJ944313 (H. conoideum) และ OL870492 (พี อกหัก)

ความชุกของตัวสั่น สวัสดี

อัตราการติดเชื้อสั่นโดยรวมคือ 22.1% (1818/8238). ง. โดยจักรยาน พบในหอยทากจากแหล่งสุ่มตัวอย่าง 11 แห่ง มีอัตราการติดเชื้อ 13.0% (1069/8238) Hypoderaum conoideum ตรวจพบการติดเชื้อในหอยทากจากแหล่งสุ่มตัวอย่างทั้งสองแห่ง โดยมีอัตราการติดเชื้อเฉลี่ย 3.8% (315/8238) ออสตราโลปาเตมอน sp. พบในหอยทากจากแหล่งสุ่มตัวอย่าง 2 แห่ง อัตราการติดเชื้อ 2.5% (206/8238) การติดเชื้อของ พี อกหัก และ: Echinostoma sp. ตรวจพบที่ไซต์สุ่มตัวอย่างเดียวที่มีอัตราการติดเชื้อ 0.4% (34/8238) และ 2.4% (194/8238) ตามลำดับ ความชุกโดยรวมและอัตราส่วนขององค์ประกอบการสั่นสะเทือนจะแตกต่างกันไปตามพื้นที่ประเภทที่ 1 และประเภทที่ 2 (ป: <0.01).

การวิเคราะห์สายวิวัฒนาการ

โดยรวมแล้ว ได้ข้อมูลลำดับ ITS2 คุณภาพสูงตัวแทน 15 รายการ รูปที่ 3 แสดงแผนผัง NJ ตามลำดับที่ส่งมาและลำดับ GenBank ที่สอดคล้องกัน ลำดับ ITS2 Echinostomasp. ก่อตัวเป็น monophyletic clade (พื้นที่สีชมพูแรเงาในรูปที่ 3A ) ที่แยกออก ง. เข้มแข็ง, อี. ฟรีดิและ: อี มิยากาไว . ลำดับของ ง. โดยจักรยาน และ: H. conoideum ควบคู่ไปกับการก่อตัวของกลุ่ม monophyletic ง. โดยจักรยาน (AY168930) และ H. conoideum (AJ564385) ข้อมูลอ้างอิง (พื้นที่สีเทาในรูปที่ 3A ) ลำดับ ITS2 ออสตราโลปาเตมอน sp. ตั้งกลุ่มกับ Burti A (KU950451) ที่มีค่าบูตสแตรป 99% แต่สร้างเชลล์เฉพาะที่มีค่าบูตสแตรป 75% รูปที่ 3B แสดงว่าลำดับของ ITS2 พี อกหัก เหมือนกับลำดับอ้างอิง พี อกหัก (KJ137231).

รูปที่ 3:
ภาพที่ 3

การวิเคราะห์สายวิวัฒนาการของ trematode ที่แยกได้จากลำดับ ITS2 และลำดับ GenBank ที่สอดคล้องกัน เอ ต้นไม้ฉันทามติ Bootstrap ที่เข้าร่วมกับเพื่อนบ้านพร้อม 1,000 bootstrap ซ้ำสำหรับ echinostome redia; ข: เพื่อนบ้านเข้าร่วมแผนผังฉันทามติบูตสแตรปด้วยการทำซ้ำบูตสแตรป 1,000 ครั้ง ออสตราโลปาเตมอน sp. และ: หัวใจคอหอย

การทดลองการติดเชื้อในห้องปฏิบัติการ Echinostomasp., ง. โดยจักรยาน และ: H. conoideum

เราทำการทดลองการติดเชื้อด้วยเครื่องสั่นสามประเภทเพื่อประเมินอัตราการสร้างปรสิตในเป็ด ลูกเป็ดถูกเปิดเผยทีละตัว Echinostoma sp. (น: = 52), ง. โดยจักรยาน (น:= 53) และ H. conoideum ตัวอ่อน (น: = 57) และทุกคนติดเชื้อสำเร็จ ระหว่างการสังเกตลูกเป็ดเพิ่มเติม (17 dpi) ที่เลี้ยง Echinostoma sp. ติดเชื้อแล้ว สวัสดี เราพบไข่ [(195.8 ± 3.1) × (143.8 ± 1.6) μm] อุจจาระและลักษณะทางสัณฐานวิทยาของผู้ใหญ่ Echinostoma sp. นำเสนอเป็นการวัด: ความยาวลำตัว (9.8 ± 1.8 มม.), ความกว้าง (1.2 ± 2.3 มม.), ปากดูด [(638.9 ± 1.9) × (399.2 ± 15.8) μm]มื้อ [(1591.2 ± 17.8) × (1338.2 ± 19.6) μm]คอ [(492.6 ± 54.3) × (331.7 ± 74.8) μm]พยานคนก่อน [(1120.5 ± 139.6) × (707.4 ± 49.2) μm]หลังเป็นพยาน [(1274.9 ± 181.1) × (880.4 ± 49.2) μm]และรังไข่ [(818.9 ± 10.2) × (527.9 ± 48.3) μm].

ในทางตรงกันข้าม เราพบว่า H. conoideum ไข่ในเป็ดที่กินผู้ติดเชื้อ สวัสดีหลังจากระยะเวลาเฉลี่ย 12 dpi จากสามไซต์ (ช่วง: 9 dpi ถึง 14 dpi) ลักษณะทางสัณฐานวิทยาของผู้ใหญ่ H. conoideum ความยาวลำตัว (1.05 ± 0.61 มม.), ความกว้าง (1.5 ± 0.27 มม.), ปากดูด [(424.2 ± 16.1) × (293 ± 11.2) μm]มื้อ [(1610.2 ± 98.4) × (1594.6 ± 198.7) μm]คอ [(379.8 ± 53.2) × (253.6 ± 44.9) μm]พยานคนก่อน [(1902.6 ± 164.6) × (875.3 ± 140.8) μm]หลังเป็นพยาน [(2045.2 ± 255.8) × (898.2 ± 139.2) μm]ไข่ [(751.7 ± 129.3) × (553.9 ± 110.6) μm]และครอบครองหนาม 50 อัน ง. โดยจักรยาน ไข่ [(104.1 ± 15.1) × (63.1 ± 12.6 μm] ตรวจพบที่ 10 dpi สัณฐานวิทยาของผู้ใหญ่ ง. โดยจักรยานโดดเด่นด้วยความยาวลำตัว (8.5 ± 1.2 มม.), ความกว้าง (2.2 ± 0.7 มม.), ปากดูด [(260.0 ± 32.5) × (180.1 ± 19.8) μm]มื้อ [(741.6 ± 23.7) × (598.3 ± 25.1) μm]คอ [(193.1 ± 30.5) × (150.6 ± 27.8) μm]พยานคนก่อน [(628.0 ± 31.2) × (459.4 ± 27.8) μm]ลูกอัณฑะหลัง (725.5 ± 17.1 × 557.9 ± 18.7 µm), รังไข่ [(411.8 ± 18.5) × (311.2 ± 15.4) μm]และการปรากฏตัวของคอปกที่มี 37 เงี่ยง.

คุณสมบัติการพัฒนาของ ง. โดยจักรยาน ลูกเป็ดถึงตัวเต็มวัย

การทดลองนี้จัดทำขึ้นเพื่อศึกษาการพัฒนาเท่านั้น ง. โดยจักรยาน ในลูกเป็ดเพราะหอยทากที่ติดเชื้อ metacercariae ไม่เพียงพอ Echinostoma sp. และ: H. conoideum . คุณสมบัติการพัฒนาของ ง. โดยจักรยาน ถูกบันทึกโดยการผ่าเป็ดที่ติดเชื้อระหว่าง 1 ถึง 10 dpi เมื่อตรวจพบไข่ในอุจจาระครั้งแรก ง. โดยจักรยานสามารถรับได้ในลำไส้เล็กที่ 1 ถึง 7 dpi จากนั้นย้ายและอาศัยอยู่ในลำไส้ใหญ่ส่วนต้นและลำไส้ใหญ่ที่ 8 ถึง 10 dpi ความยาวลำตัวเพิ่มขึ้นจาก 490 ไมครอนเป็น 8500.5 ไมครอน (เพิ่มขึ้น 17 เท่า) เด็กและเยาวชนที่ 1 dpi มีปลอกคอกลม 37 เงี่ยงในวงกลมคู่ และมีลักษณะเฉพาะคือจุกนมในช่องปากที่มองเห็นได้ชัดเจน จุกนมอะซีตาบูลัม คอหอย หลอดอาหาร และลำไส้ใหญ่ส่วนต้น ที่ 1 dpi โครงสร้างขนาดเล็กของอัณฑะปรากฏขึ้น 4 dpi รังไข่เริ่มจัดระเบียบและพัฒนา และสเปิร์มเริ่มก่อตัว มดลูกเป็นท่อ 4 dpi และการเจริญเติบโตของอวัยวะสืบพันธุ์และทางเดินอาหารเกิดขึ้น 6-8 dpi ต่อม vitelline เป็นต่อมสุดท้ายที่ปรากฏขึ้น และพบไข่สองสามตัวในมดลูกที่ 9 dpi ง. โดยจักรยานตัวอ่อนสุกเต็มที่ 10 dpi และปล่อยไข่ (รูปที่ 4) พัฒนาการประจำวันของ ง. โดยจักรยานการพัฒนาถูกบันทึกไว้ในรายละเอียดและนำเสนอผลลัพธ์ในไฟล์เพิ่มเติม 3: ตารางที่ S2

รูปที่ 4:
ภาพที่ 4

การพัฒนา ง. โดยจักรยานลูกเป็ด 1 ถึง 10 dpi